biokimia darah

I. JUDUL PERCOBAAN

“ DARAH”

II. TUJUAN PERCOBAAN

                Adapun  tujuan dari percobaan ini adalah:

a.       Menentukan Fe dalam hemoglobin

b.      Menguji daya katalitik darah

c.       Melakukuan tes terhadap komponen-komponen darah

III. LANDASAN TEORI

                Darah mempunyaii PH basa lemah yaitu sekitar 7,36 dalam tubuh, Dalam tubuh darah berfungsi sebagai alat transpor zat-zat terutama oksigen, mengatur reaksi- reaksi kimia dalam tubuh, pengatur panas dan perlindungan terhadap infeksiDarah tersusun dari sel-sel darah dan plasma darah. Sel-sel darah terdiri dari sel darah merah (eritrosit), sel darah putih (leukosit), keping darah( trombasit) ( tim dosen; 2010).

                Golongan darah adalah cara khusus mengetahui darah dari suatu individu karena adanya perbedaan jenis karbohidrat dan protein dari permukaan membran sel darah merah. Dua jenis penggolongan sel darah merah yang paling penting adalah penggabungan ABO dan rhesus. Didunia ini sebenarnya dikenal sekitar 46 jenis antigen, selain antigen ABO dan rhesus, hanya saja jarang dijumpai. Transfer darah dari golongan yang tidak kompatible dapat menyebabkan reaksi tranfusi imunologi yang berakibat anemia homolisis, gagal ginjal, syol dan kematian (Anonim; 2010).

                Beberapa fungsi darah dalam tubuh:

1.       Pernapasan:  transpor oksigen dari paru-paru kejaringan –jaringan karbondioksida dari jaringan keparu-paru.

2.       Gizi: tranpor zat-zat yang diadsorpsi melalui dinding usus.

3.       Ekskresi: tranpor sisa-sisa metabolisme keginjal, paru-paru, kulit dan usus untuk dabuang.

4.       Mengatur suhu tubuh dengan meratakan panas badan

5.       Menggatur keseimbangan asam basa dalam tubuh

6.       Tranpor hormon dan metabolit

Bobot jenis darah berfariasai antara 1,024- 1,028. Viskositas darah kira- kira 4y5 kali viskositas air (Menurut Poedjiadi; 2009; 211).

                Begitu banyak darah yang mengalir melalui kapiler sehingga secar kumulatifaf cairan yang hilang bisa mencapai sekitar 4,1 perhari. Terdapat juga beberapa kebocoran protein darah meskipun dinding kapiler tidak bbegitu permiabel terhadap molekul besar ini. Cairan dan protein yang hilang akan kembali kedarah melalui sistem limfatik atau sisitem getah bening. Cairan ini masuk kedalam sistem dengan cara berdifusi kedalam kapiler limfa kecil yang terjalin diantara kapiler-kapiler sistem kardiovaskuler. Sepanjang pembuluh limfa terdapat organ yang disebut nodus limfa atau nodus getah bening yang menyaring limfa (Campbell; 2002; 53).

                Homoglobing mengandung dua rantai α dan dua rantai β serta empat gugus heme yang masing-masing berikatan dengan rantai polipeptida. Masing-masing gugus heme dapat mengikat satu molekul oksigen secara terbalik. Karena sejumlah besar hemoglabin yang terdapat dalam sel darah merah 100 ml darah merah mamalia. Jika doksigen penuh dapat membawa 21 gas oksigen.  Jumlah oksigen yang terikat oleh homoglabin tergantung pada empat faktor:

1.       Tekanan parsial oksigen

2.       Kosentrasi 2,3-difosfogliserat

3.       Derajat Keasaman (PH)

4.       Kosentrasi karbondioksida

Pengikatan oksigen juga reversibel oleh hemoglabin disertai oleh pembebasan proton. Reaksinya:

HHb + O₂                                              HbO₂ + H⁺

Dengan demikian peningkatan PH akan mengeser kesetimbangan kekanan dan menyebabkan homoglobin mengikat O₂  lebih banyak (Lehninyjer; 1982; 53).

                Plasma darah mengandung sekitar 90% air . Diantara berbagai jenis zat yang terlarut dalam air terdapat garam-garam anorganik. Yang kadang – kadang disubut elektrolit darah dan terdapat dalam plasma darah bentuk ion terlarut. Kosentrasi gabungan ion-ion ini penting dalam pemeliharaan keseimbangan osmatik’ Beberapa ion tersebut membantu dalam menyangga PH darah. Beberap ion juga memiliki PH 7,4 pada manusia. Kemampuan otak dan saraf untuk berfungsi secara normal juga bergantu pada kosentrasi ion- ion kunci dalam cairan interstisial (Campbell;  2002; 53).

                Darah juga mengangkut karbondioksida yang terbentuk sebagai hasil ahir oksidasi bahan bakar dari jaringan keparu- paru selanjutnyankarbondioksida dalam paru- paru dibebaskan dalm bentuk hembusan udara. Darah yang meninggalkan jantung yang karbindioksida setara dengan sekitar 60 ml gas CO₂ per  100 ml darah, sedangkan darah dalam arteri yang meninggalkan paru- paru hanya sekitar 50 ml CO₂ per 100 ml (Lehninyjer; 1982; 34).

IV. ALAT DAN BAHAN

A.      Alat

1.       Cawan porselin ( 2 buah)

2.       Pipet tetes ( 10 buah)

3.       Labu semprot (1 buah)

4.       Gelas kimia 100 ml ( 1 buah)

5.       Pembakar spritus ( 1 buah)

6.       Kasa dan kaki tiga ( 1 buah)

7.       Corong biasa (1 buah)

8.       Gelas ukur 10 dan 50 ml (1 buah)

9.       Batang pengaduk (3 buah)

10.   Rak tabung reaksi (1 buah)

11.   Klem/ penjepit tabung (1 buah)

B.      Bahan

1.       Hcl 0,1N dan 1 M

2.       Larutan CH₃COOH 2M

3.       Larutan [K₄Fe(CN)₆] 0,2 M

4.       KSCN 0,2 M

5.       Larutan H₂O₂ 3%

6.       Aquades

7.       Pereaksi benedict

8.       Pereaksi millon

9.       Pereaksi AgNO₃  0,2M

10.   Kertas saring

11.   Sampel darah

12.   Larutan HNO₃ encer

V.  CARA KERJA

a. Penentuan Fe dalam hemoglobin

   1. Memasukkan 10 tetes darah kedalam cawan porselin, kemudian mamanaskan hingga membara

   2. Setelah dingin, menambahkan HCl 0,1 n dan HNO₃ yang telah dipanaskan sebelumnya

  3. Mengaduk campuran dan menyaring filtratnya

  4. Filtrat yang di peroleh dalam tabung reaksi ditambahkan K₄Fe(CN)₆ dan tabung lain dengan KSCN

  5. Mengamati perubahan warna pada setiap penambahan

b.  Tes daya kayalitik darah

   1. Memasukkan 2 ml H₂O₂ 3% kedalam tabung reaksi lalu diamati

   2. Menambahkan beberap atetes darah kedalamnya

   3.  mengamati perubahan yang terjadi sebelum dan sesudah pengamatan

C. Tes terhadap komponen- komponen darah

   1. Mencampur 25 ml aquadest  dan 5 ml liter darah kedalam cawan porselin, lalu panaskan pada pembakar spritus

   2. Menambahkan beberapa tetes asam asetat 2M dan lanjutkan pemanasan hingga terbentuk koagulasi, lalu menyaringnya

   3. Membagi filtrat kedalam tiga buah tabung. Tabung pertama, kedua dan ketiga masing- masing ditambahkan pereaksi benedict, millin dan pereaksi AgNO₃

   4. Sedangkan endapan yang ada pada no. 2 dipijarkan, lalu ditambahkan HCl kemudian  1 ml K₄Fe(CN)₆ 2 M

V. HASIL PEMGAMATAN

V.      HASIL PENGAMATAN

1.       Penentuan Fe dalam hemoglobin

10 tetes darah                darah hangus (hitam) + HCl 0,1 + HNO₃ (   )                 Filtrat dibagi 2 (    tabung 1 + K₄Fe(CN)₆)                 larutan biru prusi; (tabung II + KSCN)                      larutan coklat

 

2.       Tes daya katalitik

H₂O₂ 3 % 2 ml ( bening) +  beberapa tetes darah    larutan merah, ada gelembung

3.       Tes terhadap komponen – komponen darah

Ø  5 ml darah + H₂O 25 ml  ^{asam asetat}  larutan cokelat, ada endapan ^saring   filtrat dibagi 3:

·         Tabung I + pereaksi benedict               merah bata

·         Tabung II + AgNO₃(0,2 M) bening                endapan putih

·         Tabung III + pereaksi millon ( bening)                  2 lapisan (bagian atas: cokelat keruh; bawah: bening)

Ø  Endapan   ^saring     filtrat + HCl 1 ml + K₄Fe(CN)₆ 0,2 M                  larutan biru prusi

VI.      PEMBAHASAN

Pada percobaan ini kita membahas masalah darah, dimana sampel yang digunakan yaitu darah ayam. Adapun tujuan dari percobaan ini yaitu mengetahui kandungan Fe dalam hemoglabin, mengetahui daya katalitik darah dan komponen- komponen dari darah itu sendiri.

1.       Penentuan Fe dalam hemoglobin

Mengambil sampel darah, kemudian dipanaskan hingga membara (hangus). Tujuan dari perlakuan ini yaitu agar zat- zat lain selain Fe akan menguap. Ada tidaknya logam Fe perlu adanya penambahan HCl hal ini bertujuan untuk melarutkan besi. Reaksinya:

Fe + 2 HCl                  Fe²⁺  + Cl^- + H₂

Kemudian penambahan HNO₃ encer yang bertujuan mengubah Fe²⁺   manjadi Fe³⁺. Reaksinya:

Fe²⁺ + HNO₃                Fe³⁺ + NO + 2 H₂O

Setelah terbentuk ion Fe²⁺ dan ion Fe³⁺, maka campuran darah tersebut disaring. Hasil filtrat dibagi menjadi dua bagian. Tabung pertama ditambahkan K₄Fe(CN)₆ yang berfungsi untuk mengikat ion Fe²⁺ sesuai dengan persamaan reaksi:

Fe²⁺ + [Fe(CN)₆] + 4K⁺                 Fe³⁺ + [Fe(CN)₆]^4-

4 Fe³⁺ + [Fe(CN)₆]^4-                       Fe₄  [Fe(CN)₆]₃

Warna larutan menjadi biru prusi yang menunjukkan adanya  Fe²⁺ dalam darah. Tabung kedua ditambahkan KSCN yang bertujuan sama dengan K₄Fe(CN)₆ yaitu mengikat ion Fe³⁺. Reaksi yang terjadi:

Fe³⁺ + SCN^-                     Fe(SCN)₃

Warna larutan yang diperoleh adalah larutan cokelat. Hal ini menunjukan bahwa didalam darah terdapat ion Fe³⁺ 

2.       Tes daya katalitik darah

Mengambil H₂O₂ 3% beberapa mili, warna lurutan bening dan tak terdapat gelembung. Setelah ditambahkan beberapa tetes darah, maka warna larutan menjadi merah dan terbentuk gelembung gas. Hal ini membuktikan bahwa dalam darah terdapat enzim katalase yang berfungsi mempercepat prosese penguraian H₂O_2. Reaksinya:

2H₂O₂                 2H₂O + O₂

Hb + H₂O₂                  HbO₂ + H₂

3.       Tes terhadap komponen-komponen darah

Langkah awal dalam percobaan ini yaitu mengambil 25 ml aquadest dan 5 ml sampel darah. Kedua campuran tersebut dipanaskan dan ditambahkan beberapa tetes asam asetat yang bertujuan agar terbentuk koagolasi. Kemudian kuagolasi tersebut disaring dan filtrat dibagi menjadi tiga buah tabung. Tabung pertama ditambahkan pereaksi benedict yang telah dipanaskam sebelumnya. Tujun dari pengujian ini yaitu mengetahui adanya gula pereduksi dalam darah, uji positifnya yaitu terbentuk larutan yang berwarna merah bata. Reaksinya

 

       Pada tabung II ditambahkan  AgNO₃ yang bertujuan mengidentifikasi ion Cl^- dalam darah. Uji positifnya yaitu terbentuknya endapan putih. Reaksinya:

AgNO₃  + Cl^-                AgCl + NO₃^-

Selanjutnya, pada tabung III ditambahkan pereaksi millon yang bertujuan mengidentifikasi protein dalam darah. Uji positifnya yaitu terbentuk cicin ungu. Reaksinya:

Dalam percobaan yang kami lakukan tidak terbentuk cincin ungu melainkan terbentuk 2 lapisan (atas=cokelat keruh; bawah=bening). Hal ini disebabkan adanya kerusakan pada pereaksi yang kami gunakan .

Untuk endapan yang telah ditambahkan dengan HCl yang sebelumnya telah dipijarkan diuji dengan  K₄Fe(CN)₆ dan terbentuk larutan biru prussi.

VII. KESIMPELAN DAN SARAN

A.      Kesimpulan

1.       Pada penentuan Fe dalam hemoglobin, pada penambahan K₄Fe(CN)₆ terjadi perubahan warna biru prussi sedangkan KSCN larutan cokelat yang menendakan adanya ion Fe dalam darah

2.       Adanya gelembung menunjukan bahwa darah dapat mempercepat proses penguraian hidrogen peroksida

3.       Komponen- komponen darah terdiri dari Cl^- pada penambahan AgNO₃

B.      Saran

Diharapkan kepada praktikan selanjutnya agar sampel darah yang digunakan harus betul– betul berasal dari ayam yang sehat sehingga uji yang dilakukan sesuai dengan tujuan

 VIII.   DAFTAR PUSTAKA

                               Anonim.  2010. Golongan Darah.(online),Http://WWW.wave88.co.cc/2010/02/Golongan Darah.html. Diakses pada tanggal 5 September 2010

Campbell. 2002. Biologi. Erlangga; Jakarta

Lehniger. 1982. Dasar- Dasar Biokimia jilid 2. Erlangga; Jakarta

Poedjiadi, Anna. 2009. Dasar- Dasar Biokimia. UIP; Jakarta

Tim Dosen kimia. 2010. Penuntun Praktikum Biokimia. Jurusan Kimia FMIPA UNM; makassar




silahkan download disini