Jumat, 18 Mei 2012

biokimia susu


A.      JUDUL PERCOBAAN
“Susu”

B.     TUJUAN PERCOBAAN
Adapun tujuan dari percobaan ini yaitu untuk :
1.      Untuk mengetahui kesegaran susu
2.      Untuk mengetahui cara pemisahan kasein dari susu
3.      Untuk mengetahui reaksi warna pada kasein
4.      Untuk mengetahui pembentukan protein koagulasi.

C.  LANDASAN TEORI
Susu adalah nutrisi terpenting selama proses pertumbuhan. Masyarakat sekarang ini selalu mengkonsumsi susu karena tersedia dengan formula-formula yang penting bagi tubuh. Reaksi susu sangat mudah dipengaruhi pada proses penyimpanan. Karena susu yang disimpan di bawah suhu penyimpanan akan berakibat emulsi susu akan pecah, lemaknya akan terpisah dan terjadi denaturasi (Anonim, 2010).
Protein merupakan suatu zat makanan yang amat penting bagi tubuh, karena zat ini disamping berfungsi sebagai bahan bakar dalam tubuh juga berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. Protein adalah sumber-sumber asam-asam amino yang mengandung unsure C,H.N, dan O yang tidak dimiliki oleh lemak karbohidrat. Molekul protein mengandung pula fosfor belerang dan ada jenis protein protein yang mengandung unsure logam seperti besi dan tembaga. Fungsi utama protein bagi tubuh ialah untuk membentuk jaringan yang telah ada. Protein juga dapat digunakan sebagai bahan bakar apabila keperluan energy tubuh tidak terpenuhi oleh karbohidrat dan lemak (Winarno. F. G, 2004; 50).
Susu adalah bahan makanan yang sempurna, karena mengandung protein, lemak, karbohidrat (laktosa), vitamin dan garam anorganik. Dalam susu terdapat pafat baik sebagai protein, maupun sebagai ion posfat anorganik. Kesegaran susu dapat ditandai dengan masih aktifnya enzim-enzin yang terdapat didalamnya, diantaranya amylase, lipase, peroksidase, katalase dan sebagainya (Tim Dosen Biokimia, 2001; 13).
Menurut Anonim (2010), susu memiliki beberapa manfaat penting diantaranya:
1.      Mencegah osteoporosis dan menjaga tulang tetap kuat. Bagi anak-anak, susu berfungsi sebagai pertumbuhan tulang yang membuat anak bertambah tinggi.
2.      Menurunkan tekanan darah.
3.      Mencegah kerusakan gigi dan mennjaga kesehatan mulut. Susu mampu mengurangiu keasaman mulut, merangrang air liur, mengurangi plak dan gigi berlubang.
4.      Menetralisir racun seperti logam  atau timah yang mungkin terkandung dalam makanan.
5.      Mencegah terjadinya kanker kolon atau kanker usus.
6.      Mencegah diabetes tipe 2.
7.      Mempercantik kulit, membuatnya lebih bersinar.
8.      Membantu agar lebih cepat tidur. Hali ini karena kandungan susu akan merangsang hormone melatonin yang akan membuat tubuh mengantuk.
Semua asam amino yang ditemukan pada protein mempunyai cirri sama. Gugus karboksi dan gugus amino diikat pada atom karbon yang sama. Masing-masing berbeda satu dengan yang lain pada rantai sampingnya atau gugus R yang bervarisi dalam struktur ukuran muatan listrik dan kelarutan di dalam air. Asam amino pada protein sering kali dipandang sebagai asam amino baku, utama atau normal. Untuk membedakan molekul-molekul ini dari jeniis-jenis asam amino lain yang ada pada organisme hidup tetapi tidak terdapat didalam protein (Anna Poedjiadi, 1994; 108).
Protein terhidrolisis dengan menambahkan asam, basa dengan konsentrasi yang tinggi ataupun enzin protease. Hidrolisis secara bertingkat sebagai berikut: protein  protease   pepton   polipeptida   dipeptida   asam amino. Reaksi test biuret umum untuk peptide dan protein. Reaksi positif dengan warna ungu, karena adanya kompleks senyawa yang terjadi antara Cu dengan N dari molekul ikatan peptide (Gulam, Togu, 2001; 64).

D.    ALAT DAN BAHAN
Alat-alat yang digunakan:
1.      Tabung reaksi 8 buah
2.      Rak tabung teaksi
3.      Gelas ukur 10 ml dan 50 ml 1 buah
4.      Satu set pembakar spiritus
5.      Corong biasa
6.      Batang pengaduk
7.      Thermometer
8.      Gelas kimia 250 ml 2 buah
9.      Botol semprot
10.  Corong Buchner
11.  Pipet tetes
12.  Lap kasar dan halus
13.  Penjepit tabung
14.  Aluminium foil
15.  Cawan porselin
Bahan –bahan yang digunakan:
1.      Susu sapi segar
2.      Pereaksi shardinger (1 ml metilem biru 0,1% + 1 ml formaldehid)
3.      Asam asetet glaisal
4.      Etanol 95%
5.      Eter
6.      Pereaksi millon
7.      Pereaksi biuret
8.      Pereaksi hopkin cole
9.      Asam sulfat pekat
10.  Natrium hidroksida b1%
11.  Asam asettat 1%
12.  Indicator universal
13.  Kertas saring whatman
14.  Kertas saring biasa
15.  Lakmus merah dan biru
16.  Aquadest
17.  Tissue

E.     PROSEDUR KERJA
1.      Uji Tes Kesegaran Susu
a.       Memasukkan 5 ml susu sapi segar dalam tabung reaksi
b.      Menambahkan 0,5 ml pereaksi shardinger. Hati-hati jangan dikocok ataupun digoyangkan
c.       Mengambil 5 ml susu sapi segar, lalu menguji pH-nya dengan menggunakan indicator universal.

2.      Pemisahan Kasein
a.       Memasukkan 100 ml susu sapi dalam gelas kimia
b.      Memanaskan susu hingga suhu 40o C
c.       Menambahkan tetes demi tets 1 ml asam asetat hingga semua kasein menggumpal
d.      Menyaring endapan menggunakan kertas saring sampai sebagaian besar airnya hilang
e.       Mensuspensikan endapan kembali dengan 50 ml etanol 95%
f.       Menyaring endapan yang terbentuk dengan kertas saring
g.      Mensuspensikan kembali dengan 50 ml eter-etanol (1 : 1)
h.      Menyaring endapan dengan corong Buchner
i.        Mencuci hasil saringan dengan eter secukupnya
j.        Mengeringkan endapan

3.      Reaksi Warna Kasein
a.       Uji millon
·         Mengambil kasein dari percobaan di atas dan memasukkan kasein dalam tabung reaksi
·         Menambahkan pereaksi millon lalu memanaskannya
·         Mengamati warna yang terbentuk
b.      Uji biuret
·         Menagmbil kasein dan memasukkannya ke dalam tabung reaksi
·         Menambahkan peraksi biuret
·         Mengamati warna yang terbentuk
c.       Uji hopkin-cole
·         Menagmbil kasein dan memasukkannya ke dalam tabung reaksi
·         Menambahkan pereaksi hopkin-cole dan asam sulfat pekat melalui dinding tabung
·         Mengamati warna yang terbentuk.

4.      Protein terkoagulasi
a.       Mengambil filtrate pada percobaan pemisahan kasein dan memasukkan dalam tabung reaksi
b.      Menambahkan NaOH 1% hingga larutan netral
c.       Menambahkan 2 tetes asam asetat 1%
d.      Memanaskan larutan tersebut hingga mendidih dan membentuk basa yang berupa gumpalan
e.       Memekatkan hingga seperdua volume awal
f.       Menyaring gumpalan  yang terbentuk lalu membagi dua endapan tersebut untuk dilakukan uji millon dan hopkin-cole.

F.      HASIL PENGAMATAN
1.      Uji Tes Kesegaran Susu
5 ml susu + 0,5 ml pereaksi shardinger (1 ml metilen biru 0,7 ml + 1 ml formaldehid)  biru
5 ml susu  pH=6
2.      Uji Pemisahan Kasein
100 ml susu  + asam asetat glacial 1 ml (tetes demi tetes)  larutan putih keruh dan ada endapan putih  filtrat dan endapan + 50 ml etanol 95%  endapan + (1 : 1) eter : etanol (50 ml)  endapan putih.
3.      Reaksi Warna Kasein
·         Endapan dar percobaan 2 + pereaksi millon  larutan merah bata
·         Endapan putih + pereaksi biuret  cincin ungu
·         Endapan putih + pereaksi hopkin-cole + asam sulfat pekat  cincin ungu
4.      Protein Terkoagulasi
Filtrate dari percobaan 2 + NaOH 1%  hingga netral + asam asetat 1% 2 tetes  hingga mendidih, ada endapan putih hingga ½ volume awal   endapan dinagi 2
·         Endapan 1 + pereaksi hopkin-cole + asam sulfat pekat  cincin ungu
·         Endapan 2 + pereaksi millon  larutan merah bata.

G.    PEMBAHASAN
1.      Uji Tes Kesegaran Susu
Kesegaran susu dapat ditandai dengan masih aktifnya enzim-enzim yang terdapat didalamnya, diantaranya amylase, lipase, peroksidase, katalase dan sebagainya. Untuk menguji kesegaran susu digunakan pereaksi schardinger (1 ml metilen biru 0,7 ml + 1 ml formaldehid) yang ditambahkan ke dalam susu sapi dengan hati-hati jangan sampai goyang karena uji positif warna biru dalam larutan akan hilang dan jika goyang atau dikocok warna biru akan muncul kembali karena leuko-metilen biru adalah auto-oksidasi. Pada percobaan diperoleh larutan berwarna biru yang seharusnya warna biru hilang. Hai ini disebabkan karena susu yang digunakan tidak segar akibat sapi yang diambil susunya kurang sehat. Fungsi dari penambahahan yaitu untuk menghidrasi xantin dan hipoxantin. Dimana atom H yang dibebaskan segera diikat oleh oksigen atau akseptor lainnya seperti metilen biru membentuk air atau leuko metilen biru yang tidak berwarna.
Pada pengujian pH menggunakan indicator universal, diperoleh pH susu adalah 6 dimana pH optimum susu adalah 6,5-6,8. Hasil yang diperoleh menandakan bahwa susu sedikit asam.

2.      Uji Pemisahan Kasein
Susu sapi segar dipanaskan dalam gelas kimia pada suhu 40. Digunakan suhu 40 karena suhu optimum pada susu untuk kasein menggumpal adalah 40. Kemudian menambahkann asam asetat setetes dei tetes hingga 1 ml. Fungsinya untuk mengendapkan kasein dalam susu dan menggumpalkan kasein tersebut. Kemudian menyaring untuk memisahkan filtrate dengan kasein. Gumpalan kasein yang diperoleh disuspensikan dengan etanol 95% kemudisn kemb ali menyaring. Setelah itu gumpalan kasein kembali disuspensikan dengan eter-etanol (1 : 1). Fungsinya yaitu untuk mengikat sisa etanol. Kasein yang terbentuk disaring dengan corong Buchner dan dicuci dengan eter secukupnya. Dari percobaan diperoleh gumpalan kasein yang berwarna putih. Filtrat dan gumpalan kasein akan digunakan untuk percobaan selanjutnya. Struktur kasein :






3.      Reaksi Warna Kasein
Pada percobaan ini, dilakukan beberapa pengujian yaitu uji millon, uji biuret, dan uji hopkin-cole. Prinsip uji millon yaitu pembentukan garam merkuri dari tirosin yang ternitrasi. Tirosin merupakan asam amino yang mempunyai molekul fenol pada gugus R-nya yang akan membentuk garam merkuri dengan pereaksi millon. Dari percobaan terlihat kasein jika ditambahkan pereaksi millon dan dipanaskan, dihasilkan larutan merah bata. Ini memandakan bahwa kasein mengandung tirosin sebagai salah satu asam amino penyusunnya, yang berarti pula bahwa kasein pada strukturnya mengandung gugus fenol. Warna merah yangterbentuk adalah garam merkuri dari tirosin yang ternitrasi. Adapun reaksinya adalah





   Pada uji biuret, gumpalan kasein ditambahkan dengan pereaksi biuret yang terbentuk cincin ungu. Hal ini terjadi karena adanya reaksi peptide dan protein. Dimana reaksi ini, ditandai dengan warna ungu,karena adanya kompleks senyawa yang terjadi nrantai polipeptida. Adapun reaksinya adalah




Pada uji hopkin-cole, gumpalan ditambahkan dengan pereaksi hopkin-cole dan asam sulfat pekat menghasilkan cincin ungu. Hal ini terjadi karena reagen yang digunakan mengandung asam glioksilat, atau dapat diganti dengan formaldehid dengan penambahan asam sulfat pekat. Karena triptopan berkondensasi dengan aldehid dalam suasana asam sulfat dan membentuk kompleks berwarna ungu. Adapun reaksinya adalah




4.      Protein Terkoagulasi
Filtrate dari hasil pengendapan kasein dinetralkan kembali dengan penambahan NaOH 1 %. Setelah netral ditambahkan kembali asam asetat yang berfungsi untuk membentuk endapan kasein. Kemudian memananskannya hingga mendidih dan membentuk endapan kembali. Kemudian dipekatkan hingga ½ volume awal. Endapan kasein yang terbentuk disaring untuk memisahkan filtrate dengan kasein dan dibagi 2 untuk dilakukan uji millon dan hopkin-cole.
Pada uji millon, kasein ditambahkan dengan pereaksi millon kemudian dipanaskan terbentuk endapan merah bata yang menandakan adanya garam merkuri dari tirosin yang ternitrasi dalam kasein.
Pada uji hopkin-cole, kasein ditambahkan dengan pereaksi hopkin-cole dan asam sulfat pekat dan diperoleh cincin ungu yang menandakan adanya krypton pada kasein tersebut.















H.    PENUTUP
1.      Kesimpulan
a.       Kesegaran susu ditandai dengan masih aktifnya enzim-enzim didalamnya dengan pH 6,5-6,8.
b.      Kasein dapat dipisahkan dengan menambahkan asam asetat glacial pada suhu 40.
c.       Adanya reaksi warna kasein pada beberapa pengujian yaiut uji millon diperoleh warna merah bata dan uji biuret dan uji hopkin-cole diperoleh cincin ungu.
d.      Pembentukan protein koagulasi yang terjadi karena adanya enzim yang menyebabkan penggumpalan.
2.      Saran
Diharapkan agar praktikan memilihi sapi yang sehat yang akan diperah susunya, agar data yang diperoleh labih akurat dan untuk laboran agar melengkapi alat dan bahan untuk praktikum.













DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2010. Susu. Online (http://id.wikipedia.org.com). Diakses pada tanggal 21 Desember 2010.

Anonim. 2010. Mengenal susu dan manfaatnya. Online (http://kumpulaninfo/sehat/artikelkesehatan.html). Diakses pada tanggal 21 desember 2010.

Gulam, Togu. 2001. Individual Teks Book Biokimia Struktur Dan Fungsi. FMIPA UNY. JICA: Yogyakarta.

Poedjiadi, Anna. 1994. Dasar-Dasar Biokimia. UI: Jakarta.

Tim dosen biokimia. 2010. Penuntun Praktikum Biokimia. UNM: Makassar.

Winarno F.G. 2004. Kimia Pangan Dan Gizi. PT. Gramedia pustaka utama: Jakatra.




silahkan download disini




biokimia darah



I. JUDUL PERCOBAAN
“ DARAH”
II. TUJUAN PERCOBAAN
                Adapun  tujuan dari percobaan ini adalah:
a.       Menentukan Fe dalam hemoglobin
b.      Menguji daya katalitik darah
c.       Melakukuan tes terhadap komponen-komponen darah
III. LANDASAN TEORI
                Darah mempunyaii PH basa lemah yaitu sekitar 7,36 dalam tubuh, Dalam tubuh darah berfungsi sebagai alat transpor zat-zat terutama oksigen, mengatur reaksi- reaksi kimia dalam tubuh, pengatur panas dan perlindungan terhadap infeksiDarah tersusun dari sel-sel darah dan plasma darah. Sel-sel darah terdiri dari sel darah merah (eritrosit), sel darah putih (leukosit), keping darah( trombasit) ( tim dosen; 2010).
                Golongan darah adalah cara khusus mengetahui darah dari suatu individu karena adanya perbedaan jenis karbohidrat dan protein dari permukaan membran sel darah merah. Dua jenis penggolongan sel darah merah yang paling penting adalah penggabungan ABO dan rhesus. Didunia ini sebenarnya dikenal sekitar 46 jenis antigen, selain antigen ABO dan rhesus, hanya saja jarang dijumpai. Transfer darah dari golongan yang tidak kompatible dapat menyebabkan reaksi tranfusi imunologi yang berakibat anemia homolisis, gagal ginjal, syol dan kematian (Anonim; 2010).
                Beberapa fungsi darah dalam tubuh:
1.       Pernapasan:  transpor oksigen dari paru-paru kejaringan –jaringan karbondioksida dari jaringan keparu-paru.
2.       Gizi: tranpor zat-zat yang diadsorpsi melalui dinding usus.
3.       Ekskresi: tranpor sisa-sisa metabolisme keginjal, paru-paru, kulit dan usus untuk dabuang.
4.       Mengatur suhu tubuh dengan meratakan panas badan
5.       Menggatur keseimbangan asam basa dalam tubuh
6.       Tranpor hormon dan metabolit
Bobot jenis darah berfariasai antara 1,024- 1,028. Viskositas darah kira- kira 4y5 kali viskositas air (Menurut Poedjiadi; 2009; 211).
                Begitu banyak darah yang mengalir melalui kapiler sehingga secar kumulatifaf cairan yang hilang bisa mencapai sekitar 4,1 perhari. Terdapat juga beberapa kebocoran protein darah meskipun dinding kapiler tidak bbegitu permiabel terhadap molekul besar ini. Cairan dan protein yang hilang akan kembali kedarah melalui sistem limfatik atau sisitem getah bening. Cairan ini masuk kedalam sistem dengan cara berdifusi kedalam kapiler limfa kecil yang terjalin diantara kapiler-kapiler sistem kardiovaskuler. Sepanjang pembuluh limfa terdapat organ yang disebut nodus limfa atau nodus getah bening yang menyaring limfa (Campbell; 2002; 53).
                Homoglobing mengandung dua rantai α dan dua rantai β serta empat gugus heme yang masing-masing berikatan dengan rantai polipeptida. Masing-masing gugus heme dapat mengikat satu molekul oksigen secara terbalik. Karena sejumlah besar hemoglabin yang terdapat dalam sel darah merah 100 ml darah merah mamalia. Jika doksigen penuh dapat membawa 21 gas oksigen.  Jumlah oksigen yang terikat oleh homoglabin tergantung pada empat faktor:
1.       Tekanan parsial oksigen
2.       Kosentrasi 2,3-difosfogliserat
3.       Derajat Keasaman (PH)
4.       Kosentrasi karbondioksida
Pengikatan oksigen juga reversibel oleh hemoglabin disertai oleh pembebasan proton. Reaksinya:
HHb + O2                                              HbO2 + H+
Dengan demikian peningkatan PH akan mengeser kesetimbangan kekanan dan menyebabkan homoglobin mengikat O2  lebih banyak (Lehninyjer; 1982; 53).
                Plasma darah mengandung sekitar 90% air . Diantara berbagai jenis zat yang terlarut dalam air terdapat garam-garam anorganik. Yang kadang – kadang disubut elektrolit darah dan terdapat dalam plasma darah bentuk ion terlarut. Kosentrasi gabungan ion-ion ini penting dalam pemeliharaan keseimbangan osmatik’ Beberapa ion tersebut membantu dalam menyangga PH darah. Beberap ion juga memiliki PH 7,4 pada manusia. Kemampuan otak dan saraf untuk berfungsi secara normal juga bergantu pada kosentrasi ion- ion kunci dalam cairan interstisial (Campbell;  2002; 53).
                Darah juga mengangkut karbondioksida yang terbentuk sebagai hasil ahir oksidasi bahan bakar dari jaringan keparu- paru selanjutnyankarbondioksida dalam paru- paru dibebaskan dalm bentuk hembusan udara. Darah yang meninggalkan jantung yang karbindioksida setara dengan sekitar 60 ml gas CO2 per  100 ml darah, sedangkan darah dalam arteri yang meninggalkan paru- paru hanya sekitar 50 ml CO2 per 100 ml (Lehninyjer; 1982; 34).


IV. ALAT DAN BAHAN
A.      Alat
1.       Cawan porselin ( 2 buah)
2.       Pipet tetes ( 10 buah)
3.       Labu semprot (1 buah)
4.       Gelas kimia 100 ml ( 1 buah)
5.       Pembakar spritus ( 1 buah)
6.       Kasa dan kaki tiga ( 1 buah)
7.       Corong biasa (1 buah)
8.       Gelas ukur 10 dan 50 ml (1 buah)
9.       Batang pengaduk (3 buah)
10.   Rak tabung reaksi (1 buah)
11.   Klem/ penjepit tabung (1 buah)
B.      Bahan
1.       Hcl 0,1N dan 1 M
2.       Larutan CH3COOH 2M
3.       Larutan [K4Fe(CN)6] 0,2 M
4.       KSCN 0,2 M
5.       Larutan H2O2 3%
6.       Aquades
7.       Pereaksi benedict
8.       Pereaksi millon
9.       Pereaksi AgNO3  0,2M
10.   Kertas saring
11.   Sampel darah
12.   Larutan HNO3 encer
V.  CARA KERJA
a. Penentuan Fe dalam hemoglobin
   1. Memasukkan 10 tetes darah kedalam cawan porselin, kemudian mamanaskan hingga membara
   2. Setelah dingin, menambahkan HCl 0,1 n dan HNO3 yang telah dipanaskan sebelumnya
  3. Mengaduk campuran dan menyaring filtratnya
  4. Filtrat yang di peroleh dalam tabung reaksi ditambahkan K4Fe(CN)6 dan tabung lain dengan KSCN
  5. Mengamati perubahan warna pada setiap penambahan

b.  Tes daya kayalitik darah
   1. Memasukkan 2 ml H2O2 3% kedalam tabung reaksi lalu diamati
   2. Menambahkan beberap atetes darah kedalamnya
   3.  mengamati perubahan yang terjadi sebelum dan sesudah pengamatan
C. Tes terhadap komponen- komponen darah
   1. Mencampur 25 ml aquadest  dan 5 ml liter darah kedalam cawan porselin, lalu panaskan pada pembakar spritus
   2. Menambahkan beberapa tetes asam asetat 2M dan lanjutkan pemanasan hingga terbentuk koagulasi, lalu menyaringnya
   3. Membagi filtrat kedalam tiga buah tabung. Tabung pertama, kedua dan ketiga masing- masing ditambahkan pereaksi benedict, millin dan pereaksi AgNO3
   4. Sedangkan endapan yang ada pada no. 2 dipijarkan, lalu ditambahkan HCl kemudian  1 ml K4Fe(CN)6 2 M
V. HASIL PEMGAMATAN
V.      HASIL PENGAMATAN
1.       Penentuan Fe dalam hemoglobin
10 tetes darah                darah hangus (hitam) + HCl 0,1 + HNO3 (   )                 Filtrat dibagi 2 (    tabung 1 + K4Fe(CN)6)                 larutan biru prusi; (tabung II + KSCN)                      larutan coklat


 
2.       Tes daya katalitik
H2O2 3 % 2 ml ( bening) +  beberapa tetes darah    larutan merah, ada gelembung
3.       Tes terhadap komponen – komponen darah
Ø  5 ml darah + H2O 25 ml  asam asetat  larutan cokelat, ada endapan saring   filtrat dibagi 3:
·         Tabung I + pereaksi benedict               merah bata
·         Tabung II + AgNO3(0,2 M) bening                endapan putih
·         Tabung III + pereaksi millon ( bening)                  2 lapisan (bagian atas: cokelat keruh; bawah: bening)
Ø  Endapan   saring     filtrat + HCl 1 ml + K4Fe(CN)6 0,2 M                  larutan biru prusi

VI.      PEMBAHASAN
Pada percobaan ini kita membahas masalah darah, dimana sampel yang digunakan yaitu darah ayam. Adapun tujuan dari percobaan ini yaitu mengetahui kandungan Fe dalam hemoglabin, mengetahui daya katalitik darah dan komponen- komponen dari darah itu sendiri.
1.       Penentuan Fe dalam hemoglobin
Mengambil sampel darah, kemudian dipanaskan hingga membara (hangus). Tujuan dari perlakuan ini yaitu agar zat- zat lain selain Fe akan menguap. Ada tidaknya logam Fe perlu adanya penambahan HCl hal ini bertujuan untuk melarutkan besi. Reaksinya:
Fe + 2 HCl                  Fe2+  + Cl- + H2
Kemudian penambahan HNO3 encer yang bertujuan mengubah Fe2+   manjadi Fe3+. Reaksinya:
Fe2+ + HNO3                Fe3+ + NO + 2 H2O
Setelah terbentuk ion Fe2+ dan ion Fe3+, maka campuran darah tersebut disaring. Hasil filtrat dibagi menjadi dua bagian. Tabung pertama ditambahkan K4Fe(CN)6 yang berfungsi untuk mengikat ion Fe2+ sesuai dengan persamaan reaksi:
Fe2+ + [Fe(CN)6] + 4K+                 Fe3+ + [Fe(CN)6]4-
4 Fe3+ + [Fe(CN)6]4-                       Fe4  [Fe(CN)6]3
Warna larutan menjadi biru prusi yang menunjukkan adanya  Fe2+ dalam darah. Tabung kedua ditambahkan KSCN yang bertujuan sama dengan K4Fe(CN)6 yaitu mengikat ion Fe3+. Reaksi yang terjadi:
Fe3+ + SCN-                     Fe(SCN)3
Warna larutan yang diperoleh adalah larutan cokelat. Hal ini menunjukan bahwa didalam darah terdapat ion Fe3+ 

2.       Tes daya katalitik darah
Mengambil H2O2 3% beberapa mili, warna lurutan bening dan tak terdapat gelembung. Setelah ditambahkan beberapa tetes darah, maka warna larutan menjadi merah dan terbentuk gelembung gas. Hal ini membuktikan bahwa dalam darah terdapat enzim katalase yang berfungsi mempercepat prosese penguraian H2O2. Reaksinya:
2H2O2                 2H2O + O2
Hb + H2O2                  HbO2 + H2
3.       Tes terhadap komponen-komponen darah
Langkah awal dalam percobaan ini yaitu mengambil 25 ml aquadest dan 5 ml sampel darah. Kedua campuran tersebut dipanaskan dan ditambahkan beberapa tetes asam asetat yang bertujuan agar terbentuk koagolasi. Kemudian kuagolasi tersebut disaring dan filtrat dibagi menjadi tiga buah tabung. Tabung pertama ditambahkan pereaksi benedict yang telah dipanaskam sebelumnya. Tujun dari pengujian ini yaitu mengetahui adanya gula pereduksi dalam darah, uji positifnya yaitu terbentuk larutan yang berwarna merah bata. Reaksinya









 
       Pada tabung II ditambahkan  AgNO3 yang bertujuan mengidentifikasi ion Cl- dalam darah. Uji positifnya yaitu terbentuknya endapan putih. Reaksinya:
AgNO3  + Cl-                AgCl + NO3-
Selanjutnya, pada tabung III ditambahkan pereaksi millon yang bertujuan mengidentifikasi protein dalam darah. Uji positifnya yaitu terbentuk cicin ungu. Reaksinya:



Dalam percobaan yang kami lakukan tidak terbentuk cincin ungu melainkan terbentuk 2 lapisan (atas=cokelat keruh; bawah=bening). Hal ini disebabkan adanya kerusakan pada pereaksi yang kami gunakan .
Untuk endapan yang telah ditambahkan dengan HCl yang sebelumnya telah dipijarkan diuji dengan  K4Fe(CN)6 dan terbentuk larutan biru prussi.

VII. KESIMPELAN DAN SARAN
A.      Kesimpulan
1.       Pada penentuan Fe dalam hemoglobin, pada penambahan K4Fe(CN)6 terjadi perubahan warna biru prussi sedangkan KSCN larutan cokelat yang menendakan adanya ion Fe dalam darah
2.       Adanya gelembung menunjukan bahwa darah dapat mempercepat proses penguraian hidrogen peroksida
3.       Komponen- komponen darah terdiri dari Cl- pada penambahan AgNO3

B.      Saran
Diharapkan kepada praktikan selanjutnya agar sampel darah yang digunakan harus betul– betul berasal dari ayam yang sehat sehingga uji yang dilakukan sesuai dengan tujuan
 VIII.   DAFTAR PUSTAKA
                               Anonim.  2010. Golongan Darah.(online),Http://WWW.wave88.co.cc/2010/02/Golongan Darah.html. Diakses pada tanggal 5 September 2010
Campbell. 2002. Biologi. Erlangga; Jakarta
Lehniger. 1982. Dasar- Dasar Biokimia jilid 2. Erlangga; Jakarta
Poedjiadi, Anna. 2009. Dasar- Dasar Biokimia. UIP; Jakarta
Tim Dosen kimia. 2010. Penuntun Praktikum Biokimia. Jurusan Kimia FMIPA UNM; makassar




silahkan download disini